一種蚓激酶制備工藝（蚯蚓專利）

申請(qǐng)專利號(hào) CN99112806.0 　
專利申請(qǐng)日 1999.04.01 　
名稱 一種蚓激酶制備工藝　 　
公開（公告）號(hào) CN1229852
公開（公告）日 1999.09.29 　
類別 化學(xué)；冶金
頒證日 　
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)（專利權(quán)） 長春高斯達(dá)生化藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司 　
地址 130041吉林省長春市柳條路2號(hào)　
發(fā)明（設(shè)計(jì)）人 孫啟良; 馮來坤 　
國際申請(qǐng)  
國際公布  
進(jìn)入國家日期 　
專利代理機(jī)構(gòu) 吉林省專利服務(wù)中心 　
代理人 陳宏偉 　
摘要
本發(fā)明公開了一種蚓激酶制備工藝，將蚯蚓經(jīng)生理鹽水處理，采用勻漿、凍融法制備蚯蚓粗提物，然后通過超濾、親和層析、離子交換及分子篩等技術(shù)組合，從蚯蚓中提取純化三種有纖溶活性的蚓激酶，其分子量分別為３．０±０．２萬、２．５±０．２萬及２．２±０．２萬的三種蛋白質(zhì)，其純度分別達(dá)到ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝膠電泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）顯示一條帶，高效液相色譜（ＨＰＬＣ）呈現(xiàn)一個(gè)峰的水平，其纖溶活性均為每mg含相當(dāng)于尿激酶活性１０００單位以上。體外溶血栓試驗(yàn)證明有良好的直接溶栓作用；動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)證明，其體內(nèi)溶血栓活性優(yōu)于尿激酶。 　
主權(quán)項(xiàng)
1、一種蚓激酶制備工藝，包括以下工藝制備：將蚯蚓用清水洗凈泥土，加入生理鹽水沖洗處理，按（V／V） 1：3～5的比例加入 0．2MpH4．6 ～ 4.8的檸檬酸鈉制成勻漿，經(jīng)1000～4000rpm離心20～40 分鐘，取上清液，通過超濾法去除大分子蛋白，濾液用親和層析法初步純化，，收集活性組分，再通過離子交換柱進(jìn)一步純化，取其活性組分，再經(jīng)分子篩層析，分段收集各個(gè)活性組分，取分子量為3．0 ± 0．2萬、2．5±0．2萬及2．2＋0．2萬的三種活性蛋白質(zhì)。